用戶親證:西湖大學開發ProteanFect高效轉染小鼠原代T細胞、NK細胞及γδT細胞
西湖大學創新破局
基於天然生物學機制,實現高效基因遞送
小鼠原代免疫細胞的基因轉染長久以來都是一道難題。轉染效率低、細胞死亡率高等問題始終困擾着科研人員。現有的基因遞送方法,包括慢病毒、腺病毒、電轉以及脂質體等,都無法實現在這些原代免疫細胞中高效且安全的基因遞送,極大地制約了相關研究的進一步深入。
最近,西湖大學與西湖凝聚體研究團隊成功研發了全球首個基於內源蛋白凝聚體的轉染試劑——ProteanFect,爲這一難題帶來了新的解決方案 【圖6】 。作爲新一代非病毒、非電轉、非脂質體的轉染試劑,ProteanFect 基於天然生物學機制,在多種原代細胞中實現了高效的基因遞送。
最近一批使用者紛紛反饋ProteanFect在小鼠原代免疫細胞上轉染的高效率。我們在這裡也給大家分享他們的心得體會與喜悅:
一)清華大學免疫所、中山大學腫瘤防治中心:顛覆對原代T細胞轉染的認知
清華大學免疫所與中山大學腫瘤防治中心的科研人員在使用ProteanFect Max後,分別成功將GFP mRNA或多個目的基因片段轉染至小鼠 T 細胞。他們表示:這個真的顛覆了我們之前對T細胞轉染的認知,非常棒的試劑!
圖1:清華大學免疫所的研究者使用ProteanFect Max在小鼠原代T細胞中實現令人驚豔的轉染效果
圖2:ProteanFect在小鼠原代T細胞中轉染多個目的基因結果反饋
二)澳門大學:突破原代NK細胞轉染的多年瓶頸
自然殺傷(NK)細胞是天然免疫系統重要部分,其生物學特性使傳統轉染法難起效。澳門大學用戶曾長期在小鼠原代NK細胞轉染方面有科研瓶頸。使用ProteanFect Max後成功轉染小鼠NK細胞,她激動反饋:“我轉不上小鼠 NK 很久了,這次終於成功了,轉染後的光很明顯,我非常高興,這是我多年來第一次在轉染 NK 細胞上取得這樣的成果!”ProteanFect轉染試劑盒基於獨特原理,有效克服了小鼠原代NK細胞轉染難題。
圖3:ProteanFect在小鼠原代NK細胞中轉染EGFP mRNA結果反饋
三)暨南大學:γδT細胞轉染的驚喜成效
暨南大學的研究者在對γδT細胞轉染EGFP mRNA實驗中,證實了ProteanFect的高效核酸遞送性能。需要注意的是,γδT細胞屬於高度難轉染的原代細胞,對此研究者表示:“慢病毒、腺病毒我們都嘗試過了,之前根本無法實現轉染。” 然而,使用ProteanFect試劑盒轉染後的γδT細胞卻呈現出了較高的轉染效率。
圖4:使用ProteanFect Max在小鼠原代γδT細胞中實現高效轉染
什麼是ProteanFect?
ProteanFect系列轉染試劑盒的成功研發,源於對細胞內生物凝聚體(biomolecular condensates)的深刻認知。生物凝聚體作爲細胞內的一種特殊無膜細胞器,由蛋白質、RNA和脂質等多種生物大分子通過液-液相分離(liquid-liquid phase separation)而形成(圖5)。它在細胞中能夠快速自組裝,並參與多種重要的生物過程。有研究指出,早期的遺傳信息分子如RNA很可能在這些生物凝聚體中誕生,爲生命的起源提供了關鍵支持。
圖5:有膜細胞器與無膜細胞器
生物凝聚體的形成與一類哺乳動物內源蛋白密切相關,這類蛋白具備和核酸高效自組裝的特性。基於這樣的研發背景,科研人員對一種哺乳動物內源蛋白進行了工程化改造,進而得到了ProteanFect。ProteanFect蛋白分子與核酸高效形成高度規律的球體結構複合物。該複合物可高效進入小鼠原代免疫細胞,快速釋放核酸分子以實現基因表達。在完成基因遞送使命後,複合物會天然降解其餘蛋白成分,從而極大地降低對細胞的毒性。
圖6:ProteanFect核酸遞送原理示意圖
結語
ProteanFect轉染試劑盒在小鼠原代T、NK以及γδT細胞轉染方面所呈現出的出色表現,不過是其優異性能展示的開端而已。於實際應用場景下,該試劑盒於其他諸多類型的原代細胞以及那些向來被視作難轉染的細胞系開展的轉染實驗裡,同樣彰顯出了極爲卓越的性能。其中涵蓋了多種腫瘤細胞、造血幹細胞等等不同種類的細胞。由此可見,ProteanFect轉染試劑盒無疑具備着極爲廣泛的應用前景。
展望未來,我們相信ProteanFect轉染試劑盒將爲生物醫學研究帶來更多的突破和創新。2024年,我們還將推出限定折扣活動,爲廣大科研人員提供更優質、更實惠的產品和服務。
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